bca法测蛋白浓度试剂盒说明书

BCA法测蛋白浓度试剂盒说明书

1. BCA法测定蛋白浓度的原理：BCA与二价铜离子的试剂混合，形成苹果绿色的工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+ 还原为Cu+，使工作试剂由绿色变为紫色。在562nm下，其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

2. BCA蛋白浓度测定试剂盒成分：

1.试剂A：含有1%的BCA二钠盐、2%的无水碳酸钠、0.16%的酒石酸仿正钠、0.4%的氢氧化钠和0.95%的碳酸氢钠，调pH至11.25。

2.试剂B：4%的硫酸铜。

3.BSA标准液：用结晶牛血清蛋白配制的1.5mg/ml的标准液。

3. BCA蛋白浓度测定试剂盒的使用方法：

1.方法一：使用96孔板

2.配制BCA工作液：按照BCA试剂A和B的比例50:1配制适量的BCA工作液，并充分混匀。

3.在96孔板的蛋白标准品孔中加入不同浓度的BSA标准品，加入待测样品，每个测定要做2-3个平行样品。

4.加入BCA工作液，混匀后，在37°C温浴中孵育30分钟，然后冷却至室温。

5.在562nm波长下测定吸光度，并通过标准曲线计算出样品的蛋白质浓度。

4. BCA法测蛋白浓度的优点：简单、快速、准确。

5. BCA蛋白定量步骤：

1.梯度稀释牛血清白蛋白（BSA）标准品。

2.制备BCA工作液。

3.加入标准品和待测样品到微孔板或试管中。

4.加入BCA工作液并混匀。

5.37℃保温30-60分钟。

6.冷却至室温后，测量吸光度。

7.根据标准曲线计算样品的蛋白浓度。

6. BCA试剂盒的保存与储存条件：

1.BCA工作液室温下稳定24小时。

2.标准蛋白需在-20℃保存，有效期为12个月。

7. BCA方法制作标准曲线的注意事项：

1.标准曲线应该覆盖待测样品的浓度范围。

2.应该使用最小的样品体积，以避免影响溶液的稀释。

3.需要对每个待测样品进行至少两次测定。

8. BCA法测蛋白浓度可以通过调整孵育温度和时间来适应不同浓度的样品。

以上是BCA法测蛋白浓度试剂盒说明书的内容和使用方法。通过BCA法测定蛋白质浓度，可以快速、准确地定量蛋白质，为科研工作者提供便捷的实验方法。该方法在全世界广泛应用于蛋白质浓度的检测领域。